Expresión de microARN en plasma de pretratamiento de pacientes con enfermedades mamarias benignas y cáncer de mama

Abstract

Antecedentes: los microARN (miR) son moléculas de ARN pequeñas que influyen en la expresión y traducción del ARN mensajero (ARNm), y son fácilmente detectables en la sangre. Algunos han sido reportados como posibles biomarcadores de cáncer de mama. Este estudio tuvo como objetivo identificar y validar miRs indicativos de cáncer de mama. Resultados: Con base en el descubrimiento y la literatura, se cuantificaron 18 miR potencialmente informativos en la cohorte de validación. Independientemente de las características del paciente y del tumor, hsa-miR-652-5p se reguló significativamente en los pacientes malignos en comparación con los benignos (1,26 veces, P = 0,005) y, por lo tanto, se validó como biomarcador potencial. En la cohorte de validación basada en la literatura, los niveles de hsa-let-7b también fueron más altos en pacientes malignos (1,53 veces, P = 0,011). Dos miRs diferenciaron el tipo salvaje benigno de los portadores benignos de la mutación BRCA1 y otros 8 miRs diferenciaron metastásicos ( n = 8) de no metastásicos ( n= 41) casos en la cohorte de validación. Métodos: Se recogieron muestras de plasma antes del tratamiento de pacientes con enfermedad mamaria benigna y cáncer de mama y se dividieron en una cohorte de descubrimiento ( n = 31) y validación ( n = 84). A partir de la cohorte de descubrimiento, los miR expresados ​​diferencialmente entre casos benignos y malignos se identificaron utilizando un microarreglo de 2000 miR. Se agregaron miR basados ​​en la literatura que diferencian la enfermedad benigna de la maligna. Mediante RT-qPCR, se investigó su expresión en una cohorte de validación que constaba de muestras benignas, malignas y metastásicas previas al tratamiento. Además, se compararon casos benignos y malignos con casos benignos y malignos de portadores de mutaciones en BRCA1 . Conclusiones: Los niveles de microARN en plasma difirieron entre pacientes con y sin cáncer de mama, entre enfermedad benigna de tipo salvaje y portadoras de mutación BRCA1 y entre cáncer de mama con y sin metástasis. Hsa-miR-652-5p fue validado como un biomarcador potencial para el cáncer de mama.

Background: MicroRNAs (miRs) are small RNA molecules, influencing messenger RNA (mRNA) expression and translation, and are readily detectable in blood. Some have been reported as potential breast cancer biomarkers. This study aimed to identify and validate miRs indicative of breast cancer. Results: Based on the discovery and literature, 18 potentially informative miRs were quantified in the validation cohort. Irrespective of patient and tumour characteristics, hsa-miR-652-5p was significantly upregulated in the malignant compared to benign patients (1.26 fold, P = 0.005) and therefore validated as potential biomarker. In the validation cohort literature-based hsa-let-7b levels were higher in malignant patients as well (1.53 fold, P = 0.011). Two miRs differentiated benign wildtype from benign BRCA1 mutation carriers and an additional 8 miRs differentiated metastastic (n = 8) from non-metastatic (n = 41) cases in the validation cohort. Methods: Pre-treatment plasma samples were collected of patients with benign breast disease and breast cancer and divided over a discovery (n = 31) and validation (n = 84) cohort. From the discovery cohort miRs differentially expressed between benign and malignant cases were identified using a 2,000-miR microarray. Literaturebased miRs differentiating benign from malignant disease were added. Using RT-qPCR, their expression was investigated in a validation cohort consisting of pre-treatment benign, malignant and metastatic samples. Additionally, benign and malignant cases were compared to benign and malignant cases of BRCA1-mutation carriers. Conclusions: Plasma microRNA levels differed between patients with and without breast cancer, between benign disease from wildtype and BRCA1-mutation carriers and between breast cancer with and without metastases. Hsa-miR-652-5p was validated as a potential biomarker for breast cancer.